Es uno de los mejores agentes especiales con los que cuenta el FBI. Trabaja en colaboración con la doctora Temperance Brennan en los crímenes más difíciles de resolver. Es un tipo duro y de complexión atlética, con una enorme facilidad para relacionarse con las personas y un buen sentido del humor. Se toma las cosas con calma y tiene una paciencia infinita con la Dra. Brennan. Por lo general él se encarga de las cosas que requieren del sentido común e intuición, mientras su compañera se encarga del trabajo científico, razón por la cual hacen un equipo excepcional a la hora de encontrar al responsable. Constantemente vive atormentado por su pasado como francotirador del ejército y por ello quiere atrapar a todos los criminales que le sea posibles para pagar de alguna forma su "deuda" pendiente, ya que es muy creyente. En lo que respecta a su vida personal, tiene un hijo de 8 años llamado Parker, producto de su relación con Rebecca, una antigua pareja que no aceptó su propuesta de matrimonio al saberse embarazada. Posteriormente se le conoce una novia llamada Tessa quien solo aparece en la primera temporada y en la segunda a la Dra. Camille Saroyan, con quien mantiene un romance hasta que decide romper con ella por segunda vez, debido a las situaciones de riesgo que implican sus respectivos trabajos. Su otra relación más importante es con Hanna, una intrépida periodista a la que conoce cuando el equipo de investigación se separa al final de la quinta temporada, y él se marcha a Irak. Con ella parece haber olvidado a Brennan, y cuando ella, en un momento de debilidad, le confiesa su amor y él le dice que debe superarlo, como hizo él, pues está feliz con Hanna y la ha olvidado. Cosa que Brennan acepta, hasta que Booth se decide a pedirle matrimonio a Hanna ella le rechaza, terminando así su relación. Destaca también de su personalidad sus corbatas con dibujos y sus calcetines a rayas algo rebeldes, sin dejar de lado las grandes y provocativas hebillas que utiliza en sus cinturones. Otros datos importantes son: que tiene un hermano llamado Jared, su padre fue piloto de aviones y después barbero, su madre compositora de canciones de comerciales, así como el hecho de que en el pasado fue adicto al juego y llama "cerebrines", "cerebritos" o "frikis" al equipo de trabajo de Brennan, por considerarlos demasiado extraños. También le tiene fobia a los payasos y en un capítulo de la segunda temporada le dispara al payaso de un camión de helados. Aprecia mucho a la Dra. Brennan, a la que apoda cariñosamente "Huesos" (Bones en inglés). Siempre que se encuentran en una situación difícil, insiste en cuidarla y velar por su bienestar, ya que ella es un tanto imprudente. En ocasiones llega a estar celoso de alguna de sus parejas sentimentales, comportamiento comprometedor para tratarse solo de simples "compañeros de trabajo" y que más bien va encaminado a un interés romántico por parte de ambos (aunque ella no se percata de ello). Al final de la cuarta temporada le encuentran un tumor cerebral, del que logra recuperarse y le hace sentir un amor irrefrenable por Brennan. En la quinta temporada, empieza a hacer todo lo posible para que ésta se enamore de él. Es el propio David Boreanaz el que se encargará de dirigir uno de los capítulos, el 100, en la quinta temporada (5x16). Titulado "Las partes en la suma del todo", donde se relata cómo se conocieron Temperance Brennan y Seeley Booth y cómo fue su relación desde el principio, cosa que le revelará a Lance Sweets cosas importantes sobre ambos y el vínculo personal que los une. En el último capítulo de la sexta temporada, Brennan le informa que está esperando un hijo suyo, que resulta ser una niña, llamada Christine Ángela Booth nacida en la temporada7.